
齧齒類動(dòng)物血常規結果分析注意事(shì)項
血液學檢查是動物疾病(bìng)狀態(tài)評估、術前(qián)檢查和常(cháng)規體檢中必不可少的內容。評估血(xuè)常(cháng)規檢測報告的可(kě)靠性並解讀其結(jié)果是獸醫朋友們(men)的工作日常。本文就血液學檢查的(de)一(yī)些要點進行分析探討。
采血是進行(háng)血常規檢查的第一步,本公眾號曾經發表《獸(shòu)醫隨筆:實(shí)驗動物采血指南》一文,介紹采血量和采血點的一般指導意見(jiàn)。
進行血液學分析時通常建議用EDTA抗凝管(guǎn)采集樣本,但(dàn)采集時應該注(zhù)意抗凝劑和血液的比例。樣本質量會(huì)顯著影響(xiǎng)檢測結果,常見(jiàn)的(de)樣本質量問題有:
抗凝效果不佳導致出(chū)現血凝塊,會使血小板(PLT),白細(xì)胞(WBC),紅細胞(RBC),紅細胞壓積(HCT)假性降低;
溶血會使RBC、HCT假性降低的同時平均(jun1)紅細胞(bāo)血紅蛋白濃度(MCHC)、平均紅細胞血紅蛋白(MCH)假性升高;
乳糜血會使血紅蛋白(Hb)、MCHC、MCH假性升高;
樣(yàng)本不新鮮會使紅(hóng)細胞形態發生改變導致MCV和HCT假(jiǎ)性升高,MCHC假(jiǎ)性降低,同時白細胞形態也會發生改變。
紅細胞、白細胞和血小板是血常規報告中需(xū)要解讀的三個方麵。
紅(hóng)細(xì)胞
相比於人及其(qí)他哺乳(rǔ)類動物,齧齒類動物的紅細胞自有其特征。倉鼠的RBC約6.0微米,豚鼠的約7.8微米。大鼠出生時紅細胞較大(10.03 μm),但在出生後30天內變到小於6μm。小鼠RBC大小約4-7μm,隨年齡增(zēng)長而增(zēng)加。多色性是齧齒類動物血象的一個常見特征。在豚鼠血(xuè)塗片上還可見(jiàn)紅細胞(bāo)疊連(lián)。特定(dìng)疾病(bìng)模型小鼠中,如β地中海貧血模型小鼠RBC可觀察到異(yì)常(cháng)形態,例如靶形(xíng)紅細胞、棘形狀紅細胞、淚(lèi)滴狀紅細胞、破碎狀紅(hóng)細胞、有(yǒu)核紅細胞等。
(圖片來源(yuán):https://www.researchgate.net/publication/233535082)
和大多數(shù)哺乳動物(包(bāo)括人(rén))不同的是,新生齧齒類動物(小鼠、大鼠、豚(tún)鼠、沙鼠)的(de)血紅蛋白和血細胞比容值低於成年動(dòng)物;新出生大鼠有16%的網織紅(hóng)細胞,成年後則(zé)減少至2.5%;據報道,大鼠、沙鼠的RBC計數存在性別差異,雌性的計數通常比雄性高。不同品係的小鼠和大鼠,血紅蛋白值也會有(yǒu)很大的差異。
樣本(běn)采集部位或麻醉的影響會導致血常規數據的變化。例如,從大鼠尾部(bù)采集的樣本中(zhōng)的血紅(hóng)蛋白和紅細胞比容比從腹(fù)主動脈或心髒中采集的樣本中(zhōng)要高。豚鼠中已經證實RBC值可能由於麻醉期間發生(shēng)脾內紅細胞扣留而降低。
影響RBC參數的非致病性(xìng)條件還包括妊娠(shēn)、季節變化等。在大鼠中,紅細胞比容在妊娠期間減少。在倉鼠中,RBC計數、血紅蛋(dàn)白濃度和紅細胞比容在冬眠期間升高,這是因為在冬眠期間,倉鼠基礎代謝率降低,RBC壽命延(yán)長了。
紅細胞和貧血
紅細胞指標重(chóng)點關注RBC、HCT和Hb,它們的變化可以提示動物貧血或紅細胞增多。
齧齒類動物中並(bìng)沒有原發性的紅細胞(bāo)增(zēng)多症,但可能見於輕度脫水的動物。貧(pín)血則較為常(cháng)見。初步(bù)判斷為(wéi)貧血後,還需要關注平均紅細胞體積(jī)(MCV),MCH和MCHC,可用於(yú)輔助判斷貧血類型(xíng),這三項都偏低常見於缺鐵性貧血,而高於正常範圍(wéi)多(duō)見於葉酸或維(wéi)生素B12缺乏引起的貧血。網織紅(hóng)細胞是尚(shàng)未完全成熟的紅細胞(bāo),是反映骨髓(suǐ)造血功能的重要指標(biāo)。當其升高時(shí),提示骨(gǔ)髓造血功(gōng)能旺盛,可能有溶血性(xìng)貧血、缺鐵性貧血等;而當其降低時(shí),可能(néng)有再生障礙性貧血、急性白血病等。
儀器(qì)分(fèn)析(xī)的血常規化驗單隻能給出各種細胞的數量,但並不能(néng)給出細胞(bāo)形態的(de)異常描述。因此為了更準確分析血液學檢(jiǎn)查結果還建議(yì)對血樣塗片進行形態學檢查。
RBC形(xíng)態學可區分貧血的原因:出血(xuè)、溶血、缺鐵、非再生性貧血、骨(gǔ)髓疾病(bìng)或淋巴細胞(bāo)增生性(xìng)疾病(白血(xuè)病)等。
如果診斷為溶血性貧血,則需要在血塗片中尋找血液(yè)寄生蟲的證據,如球狀附紅細胞體和鼠血巴爾通體可能導致小鼠或大鼠貧血。如果出現小紅細胞增多症、血色素(sù)減少、總蛋白低(dī)、血小板增多和網織紅細胞計數升高則提示有慢(màn)性失(shī)血,建議檢查體表寄生蟲,在虱子嚴重感染的豚鼠和大鼠中(zhōng)可見這種現象。
白細胞
白細(xì)胞(bāo)是(shì)機體抵禦感染、調控炎症、免疫(yì)和(hé)造血的關鍵。
齧齒類動物的(de)白細胞形態和(hé)其他哺乳(rǔ)動物相似,但又有(yǒu)一定區別,齧齒(chǐ)類動物的粒細胞被稱為嗜異性或假嗜酸性(xìng)粒細(xì)胞,因為(wéi)它(tā)含有紅色顆粒,與嗜酸性粒細胞相似。豚鼠有獨(dú)特的Foa-Kurloff細胞(一種T淋巴細胞),含(hán)有一個大的細胞質包涵體。齧齒類動(dòng)物的白細胞類型與其他哺乳動物相似,但淋巴細胞數量遠超過粒細胞:淋巴細胞約占86%,中性粒細胞約占10% ~ 25%,單核細胞約占6%,嗜酸(suān)性粒細(xì)胞約占1% ~ 4%,嗜(shì)堿性粒細胞很少。
WBC計數每天都會發生波動,因此采集樣本的位置和時間不同,結果也可能不同。中(zhōng)性粒細(xì)胞計數隨著大鼠年齡的增長而增加,淋巴細胞計數隨著年齡的增長而減少。
豚鼠的Kurloff 細胞
(圖片來源:https://en.wikipedia.org/wiki/Kurloff_cell)
白細胞:淋巴細(xì)胞
淋巴細胞增多
淋巴細胞分為T淋巴細胞和B淋(lín)巴細胞(bāo),大多在外周淋巴組織(zhī)中生成並在血液和淋巴組織中(zhōng)循環。淋巴細胞的增多大多為生理性的。反應性淋巴細胞增(zēng)多的原因包括注射疫苗後的短暫反應、長期免疫(yì)刺激、甲狀腺(xiàn)功能亢進等;腎上腺皮質功(gōng)能減退也會導致(zhì)淋巴細胞增多,並常伴隨低血糖、電解質(zhì)異常(cháng),出現高鉀低鈉和高鈣血症(zhèng);淋巴瘤、胸腺瘤可見淋巴細胞異常升高(gāo),淋(lín)巴細胞(bāo)性白血(xuè)病則在(zài)淋巴細胞(bāo)異常升高的(de)同時伴有其他細(xì)胞係的減少。
淋巴細胞(bāo)減少
淋巴(bā)細胞減少最常見的原因是內外源性皮質(zhì)類固醇激素增多,導(dǎo)致其從血液循環中轉移到淋巴(bā)組織(zhī)中。在急性炎症反應、病毒感染(rǎn)以及發生內毒素血症和敗血症時,也可見淋巴細胞減少。免疫缺陷病毒感染、免疫抑製藥物的使用也會讓淋巴細胞(bāo)生成減少(shǎo)。淋巴(bā)回流受阻或丟失也會讓其(qí)計數減少。
(A)淋巴細胞,特征是有深紫色圓形核;(B)單(dān)核細胞(bāo),特征是有腎形細胞核(hé);(C)中性粒細胞,特征為有紫色多小葉細(xì)胞核。
(圖片來源:Bjorner & Zhu, 2019)
白細胞:中(zhōng)性粒細胞
中性粒細胞增多
與其他哺乳動物一樣,急性炎症反應的特征是中性粒細胞增多並有核左移。但並不是出現中性粒細(xì)胞增多就意味著急性炎症反(fǎn)應,動物經曆劇烈運動、驚嚇傷心等(děng)強烈(liè)情緒後也可(kě)出現(xiàn)生理性中性粒細胞增多,但不會出現(xiàn)核左移。
應激(jī)或皮質類固醇(chún)也可導致(zhì)動物出(chū)現中(zhōng)性(xìng)粒細胞(bāo)數量增加,無左移。
此外慢性粒細胞性白血病、中性粒(lì)細胞功能障礙也可使中性粒細胞數量增(zēng)加,同時出現核左(zuǒ)移、多(duō)組織髓外生成粒細胞、血小板減少等異常。
正常情況下,外(wài)周血液中性粒細胞以分葉核為主,胞核常分為2~5葉,杆狀核較少。中性(xìng)杆狀核粒細胞增多或(和)出現(xiàn)晚幼粒細胞、中幼粒細胞,甚(shèn)至原始/早幼粒細胞的現象,稱為核左(zuǒ)移。
中性粒(lì)細胞減少(shǎo)
中性粒細胞減少也非常常見,其中臨床常(cháng)見的因素為嚴重的細菌感染,例如肺炎、敗血(xuè)症、腹(fù)膜(mó)炎等,常會伴隨核左移和中毒性變(biàn)化。骨髓疾病、藥物毒性、病毒感(gǎn)染和腫瘤等也可造(zào)成中性粒細胞減少(shǎo),同時可能(néng)會伴有紅細胞(bāo)和血(xuè)小板的減少。
白細胞:嗜酸性粒細(xì)胞
嗜(shì)酸(suān)性粒細(xì)胞主要聚集在皮膚、消化道和(hé)呼吸道黏膜等疏鬆(sōng)結締組織中,它的增多常見於寄生蟲感染的動物和發生I型超敏反應的動物。也由於(yú)其分布特(tè)點,大多血液寄生蟲不會引起嗜酸性(xìng)粒細胞增(zēng)多。此外,還有一些臨(lín)床原因可導致嗜酸性粒細胞增多,比如嗜酸性粒細胞性腸炎、嗜酸性肌炎等炎(yán)症反應;某些能(néng)促進嗜酸性粒細胞生成(chéng)和釋放的腫瘤(liú)(淋巴瘤、鱗狀(zhuàng)細胞癌等);腎上腺皮質機能減退等。
白細胞:嗜堿性粒細胞
嗜堿性粒細胞參與遲發性過敏和寄生蟲免(miǎn)疫反應,因此嗜堿性粒細胞增(zēng)多症常和嗜(shì)酸性粒細胞增(zēng)多症同時發生。此外還可見於高脂血症、嗜堿性粒細胞性白血病(bìng)和骨(gǔ)髓增生性(xìng)疾病。
白細胞:單核細胞
單核細胞等主(zhǔ)要功能是吞噬作用(yòng)、調節炎症反應(yīng)、參與抗原提呈、參(cān)與鐵的調節。因此當機體(tǐ)出現急性或慢性炎症(zhèng)、組織壞死時,都會導致單核細胞增多(duō)。中性粒細胞減少時也(yě)會出現單核細胞代(dài)償性增加。其他不常見的原因還(hái)包括應激或類固醇、單核細胞白血病等。齧齒類動物中,多達25%的F344大鼠(shǔ)會發生單(dān)核細胞性白(bái)血病。發病動物外周血中,可(kě)見非典型性單核細胞,白細胞計數極度增高和溶血(xuè)性貧血。
血小(xiǎo)板
血小板為骨髓巨核細胞胞漿裂解脫落的小塊胞質,其主要作用是(shì)凝血和止血,修補破損血管。齧齒類動物的血小板數量和凝血過程與其他哺乳動物(wù)相似。在(zài)小鼠、大鼠或豚鼠中,未觀察到血小板計數的性別或品係差異。大鼠的(de)血小板會聚(jù)集(jí),計數往往不可靠。
血小板減少
血小板減少症發生時,動物可出現瘀斑、瘀點、黏膜出血、止(zhǐ)血困難等。但血液(yè)分析(xī)儀判讀(dú)為血小板減少時,應做(zuò)血塗片確認(rèn)是否發生凝集,因為血小板做血液(yè)采集、運輸(shū)、儲存過程中會活化並凝集進而影(yǐng)響(xiǎng)機器(qì)讀取數據。通過無創性靜脈穿刺采血、使用檸(níng)檬酸鹽抗凝(níng)劑、減少采樣後儲存時間、避免低溫(wēn)等措(cuò)施可以(yǐ)減少這(zhè)種影(yǐng)響。
通常血小板減少是一過性的,跟多種係統性疾病(bìng)都有關聯,隨(suí)著疾病的康複,血小板計數也會恢(huī)複正常(cháng)。持續性的或進行(háng)性的血小板(bǎn)減少症表明血小板(bǎn)生成或消耗持續失衡。例如血小板減少(shǎo)伴隨白細胞減少和(或(huò))貧血通常提示骨髓疾病引起的造血功能障礙;免疫介導的破壞等。
血小板(bǎn)增多
血小板計(jì)數增多可能由原發(fā)性血小板增多症、骨髓增(zēng)殖性疾病和繼發性血小板增多症引起。