
檢測到陽(yáng)性結果,然後(hòu)呢?
盡管所(suǒ)有實驗動物管理(lǐ)人員都不希望拿到(dào)一份微生物檢測陽性的報告,但實際上,這種情況無法避免。那拿到陽性報告後我們應該(gāi)怎麽辦呢?
在采取任何行動之前,需要第一(yī)時(shí)間聯係(xì)檢測實驗(yàn)室,確認應如何解讀(dú)陽性報告(gào)。雖然大(dà)多數情況下,“陽性(xìng)”意味著(zhe)感染的存在,但並(bìng)非所有的“陽性”結果都是可靠的,即使(shǐ)結果可靠有些時候也並不意味著動物(正在)發生感染(rǎn),甚至有些時候,動(dòng)物正在感染(rǎn)某種(zhǒng)病原體,也並不意味著一定要采(cǎi)取幹預措施。這取決(jué)於(yú)多個因素,包括病(bìng)原體的特性、檢測方法的選(xuǎn)擇、檢測(cè)工作(zuò)的質控過(guò)程、檢測試劑的可靠性等。和檢測實驗(yàn)室(shì)的充分溝通可以更準確的了(le)解檢測報告中的(de)“陽性”的可靠(kào)性和意義,以便決定後續應對措施。
有一(yī)些(xiē)病原體感染具有自(zì)限性(例如MHV、仙台病毒等),因此在(zài)感染後期,常會(huì)出現核酸(suān)檢測是陰性(xìng)但抗體檢測是陽性的情況;而另一(yī)些(xiē)病原體(例如牛棒(bàng)狀杆菌、MNV等)常會呈現持續性(xìng)感染,即使沒有臨床症狀(zhuàng),也會長期排(pái)毒/菌;采(cǎi)集環境樣本檢測到(dào)某種病原體核(hé)酸陽(yáng)性可能是由於新(xīn)發生的感染所致,也可(kě)能是(shì)既往感染或其它原因殘留的核酸所致;絕大多數(shù)情況下(xià)血清(qīng)學檢測結果都是可靠(kào)的,但是偶爾也會(huì)有交叉反應所(suǒ)導致的假陽性結果;檢測實驗室的質控(kòng)水平和試劑的穩(wěn)定性更是直接決定結果(guǒ)是否可靠。
在確認首次報告的陽性結果的可信度後,可能會需要擴大檢測範圍、重(chóng)新采樣或更換檢測方法才能確認被檢測動物是否感染。確認感染後(hòu),依然會有諸多因素影響管(guǎn)理者的(de)決策:
01被檢測到陽性的動(dòng)物來源
尚處(chù)於檢疫期(qī)的動物(wù)中如果(guǒ)檢測到陽性結(jié)果,往往會被拒絕進入設施(shī);如果是已經處於實驗中的動物則會根據檢(jiǎn)測到的病(bìng)原體種類再做決定(dìng),例如是否人獸共患病原體,是否影(yǐng)響動物健康,是否影響實驗數據等;如果是生產性質的(de)設施,通常需要立(lì)即采取隔離(lí)措施,必要時撲殺和(或)重新淨化動(dòng)物,同時(shí)對環境進行(háng)徹底清(qīng)潔消(xiāo)毒。
02檢測到的病原體種類
如(rú)果檢測到(dào)的病原體是人獸共患病原,例如漢坦(tǎn)病毒、結核(hé)分枝杆菌等,則應該立即采取措施,隔離(lí)並撲(pū)殺陽性動物。同時要密切監測與其有(yǒu)直(zhí)接或間接接觸的同一微生物單元的其它陰性動物,如果是非人靈長(zhǎng)類動物,對每一個體都應該進行檢測。
而對於那些對(duì)動物(wù)健康有影響(xiǎng)或(huò)者對實驗數據有重要(yào)影響的病原(yuán)體,也應該立即擴大篩查範圍,隔離發生感染(rǎn)的微生物單元,停止繁殖和新(xīn)引進動物,淘汰所有非必要的動物,對珍貴品係,可重新淨化。例如發生(shēng)小鼠肝炎病毒感染(rǎn)或牛(niú)棒狀杆菌感染,由於它們感染免疫缺陷動物後臨床症狀明顯,且顯著影響實驗,大多數管理者都會(huì)選擇查明感染源和感染範圍,采取措施清除感染。而遇到MNV時,一些設施負責人則會選擇(zé)截然不同的(de)策略,免疫正常和大多數免疫缺陷小鼠感染MNV後不會表(biǎo)現臨床症狀,僅幹擾素α、β、γ受體和(hé)STAT1基因缺失的小鼠(shǔ)感(gǎn)染MNV後會出現體重減輕、豎(shù)毛和(hé)弓背等全身(shēn)性疾病,且(qiě)有較高死亡率。此外,MNV對巨噬細胞和樹突狀細胞的趨向性可能(néng)會改變免疫反應影響免疫相關研究,還可能會幹擾涉及腸道疾病的研究。因此不飼養相關小(xiǎo)鼠和不做相關研究的設施並不會(huì)把MNV作為自己的監測項目;而另一些設施盡管也監測這一項目,但僅僅是為了了解動物感染情況,實行“分級(jí)管理”,並不會一刀切地將(jiāng)所有陽性動物都拒之門外;當然,也有管理者嚴格要求所有動物必須為陰性,發生感染後會采取清除措施。上述“分級管理”的策略盡管是一種妥協,但在現有條件下可能會更符合大多數管理者(zhě)的理(lǐ)念。
此(cǐ)外發生感染(rǎn)後在設施內的流行率(lǜ)也會影響決(jué)策,例如,在現代設施中如果動物群體中存在呼腸孤病毒-3型感染,流行率也隻會維持在非常低的水平,但如果(guǒ)發生MHV感(gǎn)染,即使IVC籠架(jià)可以很大程度上減少不同籠(架)動物之間的交叉汙染,但由於其極強的傳(chuán)播效率,流行率也可以輕鬆突破50%。因此對於傳播性弱,流(liú)行率低的病原體,管理者往往更能容忍。
另外,如果你的動物供應商無法(fǎ)提供特定病原體陰性的動物,也沒有辦(bàn)法將其從你的設施清除。近幾年,越來越多的機構從出現皮屑症狀的小鼠中分離到木糖葡萄球菌,作為一種條件(jiàn)致病菌,其在小鼠皮膚表麵有非常(cháng)高的檢出率,美(měi)國Charles River實驗室(shì)近年公布(bù)的數據顯示陽性率為51.8%(n=1426),我(wǒ)國第三方檢測機(jī)構蘇州(zhōu)西山生物的檢測陽性率為43.2%(n=192),幾乎所有的動物(wù)供應商都(dōu)沒有將木糖葡萄球菌列入自己的應排除病原體清單或常規監(jiān)測清單。在這一背景下,即使檢測到陽性(xìng)結(jié)果(guǒ),除了對出現症狀(zhuàng)的動物進行處理外,並無更多(duō)選擇。
03設施的基本情況
設施情況(kuàng)很多時候也嚴(yán)重影響管理者的決(jué)策,包括設(shè)施和種(zhǒng)群總規(guī)模,發生汙染的區域和種群大小,人力資源是否(fǒu)充足,是否有足夠空間,技術儲備是否充分,項目負責人是否支持和配合等。對陽性動(dòng)物(wù)進(jìn)行排查(chá)和處理是一(yī)係列(liè)高度專業性的操作,所有參(cān)與者之間都要密(mì)切配合精密(mì)運轉,任何環節的細微漏(lòu)洞都會讓清除工作功虧一簣。
04預算
預算則是最不可忽視的(de)一(yī)點,不論是篩查確認感染範圍、淘汰感染(rǎn)動物、空間和籠器具的(de)清(qīng)洗消毒、重新淨化或引進動物、處理後的動物和環境的確認等都需要不菲的成本。也正是由(yóu)於一旦發(fā)生感染,後續處理成本高昂,對實驗項目的影響大,故而實驗動物從業人員的普遍共識是預防重於治理。
綜上所述,在檢測報告中出現陽性結果後,首先應(yīng)確認檢測結果的可靠性並正確解讀報告,如果確認動物感染,則需要管理者根據感染動物的來源(yuán)、病原體種類、設施的基(jī)本情況、預算等多個(gè)因素綜合考慮,決定是容忍該病原體在自己的設施內有一定程度的流行(háng),還是必須清除。